Untersuchungen zur potenziellen Pyrrolizidinalkaloid-Belastung von Galloway-Rindern in ganzjähriger Weidehaltung auf Flächen mit Jakobskreuzkraut (Senecio jacobaea L.)

Einige der geschätzt über 6.000 Pflanzenarten, die Pyrrolizidinalkaloide (PAs) als sekundäre Pflanzeninhaltsstoffe bilden, gehören zu den weltweit bedeutendsten Giftpflanzen für Tiere und Menschen (Bode und Dong 2015). Die über 660 bislang beschriebenen PAs werden von den Gewächsen als Verteidigungsmechanismus gegen Fraßfeinde produziert. Das in vielen Gebieten Europas heimische Jakobskreuzkraut (JKK) – auch Jakobs-Greiskraut (Senecio jacobaea L. syn. Jacobaea vulgaris Gaertn.) genannt, enthält, in Abhängigkeit von der Jahreszeit und den untersuchten Pflanzenteilen, unterschiedlich hohe Gehalte der PAs (z. B. Seneciphylllin, Senecionin, Jacozin, Jacobin, Jacolin und Jaconin) und der jeweils korrespondierenden N-Oxide (Crews und Driffield 2009, Carvalho und Macel 2014, Avula et al. 2015). Seit Jahrzehnten ist bekannt, dass PAs nach der oralen Aufnahme von JKK durch Tiere oder Menschen in der Leber zu alkylierenden Pyrrolderivaten metabolisiert werden, die hepatotoxische, mutagene und karzinogene Eigenschaften besitzen (Schoental 1968, Allgaier und Franz 2015). Insbesondere Pferde und Rinder scheinen hierbei für akute und chronische Intoxikationen empfänglich zu sein (Cortinovis und Calloni 2015). In den letzten Jahren wird eine zunehmende Ausbreitung des JKK auf Grünland, Brachflächen und Straßenböschungen in verschiedenen Gebieten Deutschlands beobachtet (MLR Baden-Württemberg 2009, Huckauf et al. 2017). Als Ursachen dieser Verbreitung werden unter anderem der Klimawandel, die natürliche Populationsdynamik des JKK und Fehler in der Grünlandbewirtschaftung diskutiert. Im Zuge dessen wird auch die ökologische Weidehaltung von Robustrindern auf Naturschutzflächen mit JKK-Bewuchs kritisch beleuchtet. Bei Rindern führen die in der Pflanze enthaltenen Bitterstoffe und ein mutmaßliches „Lernverhalten“ innerhalb der Herde vermutlich dazu, dass die frischen Pflanzenteile gemieden werden. Eine Aufnahme durch weidende Tiere könnte dennoch unbeabsichtigt als Beifraß mit benachbarten Futterpflanzen oder durch Futterknappheit zustande kommen. Neben den Aspekten der Tiergesundheit wird auch ein möglicher Übergang von PAs in das Fleisch der lebensmittelliefernden Tiere und eine damit einhergehende nicht auszuschließende Gefährdung des Verbrauchers diskutiert.

Es wurden 26 ganzjährig extensiv gehaltene Rinder der Rasse Galloway (26 bis 86 Monate alt), die auf fünf verschiedenen Flächen in Schleswig-Holstein geweidet hatten, in die Studie einbezogen. Zwei der Flächen waren durch regelmäßige vorhergehende Kartierungen bereits für ihren JKK-Aufwuchs bekannt. Im Oktober 2015 wurde der JKK-Bewuchs zudem mithilfe eines Holzrahmens (1 m2) an 20 zufällig ausgewählten Stellen auf der jeweiligen Fläche beurteilt. Hierzu wurden blühende/verblühte Pflanzen und Rosetten ohne sichtbares Blütenstadium gezählt. Die drei Flächen, von denen kein JKK-Bewuchs aus den letzten Jahren bekannt war und auf denen zum Zeitpunkt der Begehung keine blühenden/verblühten Pflanzen und Rosetten nachweisbar waren, wurden als Kontrollflächen bezeichnet. Die zwei Flächen, von denen ein JKK-Bewuchs bekannt war und auf denen blühende/verblühte Pflanzen und Rosetten zum Zeitpunkt der Begehung zu finden waren (5,45 ± 2,54 bzw. 0,15 ± 0,36 JKK-Pflanzen/m²), wurden in der Studie als JKK-reiche Flächen betrachtet. Rinder von diesen JKK-reichen Flächen hatten vor dem Zeitpunkt der Schlachtung etwa vier Jahre lang auf den Weiden gestanden (potenzielles Angebot von JKK) und wurden der Gruppe JKK-reich zugeordnet (N = 12 ♀). Tiere aus der Kontrollgruppe (N = 12 ♂; N = 2 ♀), hatten zu keinem Zeitpunkt auf JKK-reichen Flächen geweidet. Eine Beobachtung des Fressverhaltens auf der Weide fand nicht statt. Alle Tiere wurden einmalig nach dem Absetzen und nachfolgend nach individuellem Bedarf entwurmt (Cydectin-Triclamox). Als alleinige Ergänzung zum Aufwuchs auf der Weide stand den Tieren Mineralfutter zur Verfügung (16 % Ca, 4 % P, 10 % Na, 3 % Mg). Alle Rinder wurden regulär geschlachtet und der Fleischbeschau unterzogen.

Im Rahmen des Entblutungsschnittes wurde von allen Tieren Blut in Serumröhrchen (SARSTEDT S Monovette 9 ml, 92 x 16 mm, Serum – SARSTEDT Nümbrecht) aufgefangen und im Labor bei 3.500 U/min für 10 min zentrifugiert. Das Serum wurde in 2 ml Eppendorf- Gefäße überführt und bei –18 °C tiefgefroren. Im klinisch-chemischen Labor der Klinik für Rinder (Tierärztliche Hochschule Hannover) erfolgte die photometrische Bestimmung von Aspartat-Aminotransferase (AST; Referenzwert < 50 U/I), γGlutamyltransferase (GGT; < 20 U/I), Glutamatdehydrogenase (GLDH; < 8 U/I), Cholesterol (Chol; < 3mmol/L), Harnstoff (Hst; < 8 mmol/L), Gesamteiweiß (GEW; 60–80 g/L) und Gesamtbilirubin (Gbi; < 7 mmol/L). Kalium (Referenzwert 3,5–4,5 mmol/L) wurde mittels ionenselektiver Elektrode gemessen (Pentra 400 ABX Diagnostics – HORIBA, Oberursel). Der β-Carotin-Gehalt (Referenzwert > 200 µg/dL) wurde optisch mittels semiquantitativem Farbtest ermittelt (DSM, Niederlande). Als Referenzwerte wurden die Referenzwerte für Rinderblut des Labors der Klinik für Rinder der Tierärztlichen Hochschule Hannover angenommen.

Im Rahmen der Fleischuntersuchung wurden alle Lebern einer eingehenden makroskopischen Beurteilung unterzogen. Stauungserscheinungen der Gallengänge wurden nach subjektiven Schweregraden eingeteilt (keine Stauung/gering- bis mittelgradige Stauung/hochgradige Stauung). Für die histologische Untersuchung wurden aus einem unauffälligen Areal jeder schlachtfrischen Leber (Lobus hepatis sinister bzw. Lobus quadratus) jeweils drei ca. 2,5 x 2,5 x 2,5 cm große Teilproben entnommen und in 4%ige Formalin-Lösung überführt. Nach Fixierung aller entnommenen Leberproben in 4%igem Paraformaldehyd folgte eine Hämatoxilin-Eosin-Färbung (HE) bzw. Azan-Färbung in Anlehnung an Mulisch und Welsch (2015). Anschließend wurden die Präparate am Institut für Pathologie (Tierärztliche Hochschule Hannover) mikroskopisch auf strukturelle und funktionelle Veränderungen untersucht. Histopathologische Veränderungen wurden in dreizehn Kategorien eingeteilt (Tab. 3).

Kotproben aus dem Rektum der Tiere wurden nach der Schlachtung genommen. Diese wurden mittels des Sedimentationsverfahrens, Flotationsverfahrens und das Auswanderungsverfahrens untersucht (Thienpont et al. 1990, Deplazes et al. 2012).

Gewebeproben (je ca. 15 g) aus Leber (Lobus hepatis sinister), retroperitonealem Nierenfett und Unterzungenmuskulatur wurden bis zur weiteren Untersuchung bei –18 °C gelagert. Aufbereitung und LC-MS/MS (ThermoScientific TSQ Quantum Ultra) auf 30 PA und deren N-Oxide erfolgte durch Intertek Food Services GmbH, Bremen, Deutschland (Tab. 5). Muskel- und Leberproben wurden nach einem modifizierten QuEChERS-Verfahren (Anastassiades et al. 2003) bearbeitet (Intertek Food Services GmbH), Fettproben entsprechend der RIKILT-Methode von Mulder und López Sánchez (Mulder et al. 2015).

Die Auswertung erfolgte mithilfe der Statistiksoftware R Version 3.3.0 (2016). Serumparameter wurden unter Annahme von Normalverteilung und Homoskedastizität mittels Kovarianzanalyse (Ancova) untersucht (Cochran 1957). Die Gruppe der Tiere (JKK-reich und Kontrolle) wurde als fixer Effekt und das Alter als Kovariable in das Modell inkludiert. Das Geschlecht und die Fläche wurden als zufällige Einflussgrößen in die Auswertung aufgenommen (Laird und Ware 1982, Verbeke und Molenberghs 2000). Für jeden Parameter wurde zunächst ebenfalls der Interaktionseffekt von Alter und Gruppe als fixer Effekt in das Modell einbezogen. Da bei keinem der untersuchten Blutparameter eine Wechselwirkung zwischen Alter und Gruppe festgestellt wurde, wurde das finale ANCOVA Modell ohne Wechselwirkungseffekte berechnet. Für die Serumparameter wurden jeweils die beiden Intercepts (Absolutglieder) für die Gruppen JKK-reich und Kontrolle bestimmt sowie der durchschnittliche Anstiegsparameter des Alters auf Signifikanz überprüft. Histopathologische Ergebnisse wurden mittels Exaktem Test nach Fisher (Fisher 1935) analysiert. Für die Parameter Alter und Schlachtgewicht wurden der Zweistichproben-t-Test durchgeführt (Student 1908, Welch 1938). Parasitologische Ergebnisse wurden mittels Chi-Quadrat-Test (Pearson 1900) bzw. bei Zellenhäufigkeiten < 5 mittels Exaktem Test nach Fisher (Fisher 1935) analysiert. Für alle statistischen Modelle wurde ein Signifikanzniveau von p < 0,05 angenommen.

Alle Tiere wurden nach amtlicher Fleischuntersuchung als genusstauglich bewertet und der Lebensmittelkette zugeführt. Mit einem Altersdurchschnitt von 68,4 Monaten (SD ± 11,2; σ² = 137,5) waren die JKK-Tiere signifikant älter [t (24) = 7,41 p < 0.01] als die Kontrolltiere (35,5 Monate, SD ± 10,5; σ² = 119,0). JKK-Tiere hatten ein mittleres Schlachtgewicht von 259 kg (SD ± 34). Sie waren damit nicht signifikant schwerer als die Kontrolltiere (246 kg, SD ± 21; σ² = 477). Alle JKK-Tiere waren weiblich. Bei den Blutwerten (Tab. 1) konnte kein signifikanter Unterschied zwischen JKK-Tieren und Kontrollgruppe gezeigt werden (Tab. 2). Im Blut zweier Tiere der Kontrollgruppe konnten aufgrund von Hämolyse γ-Glutamyltransferase, Kalium, β-Carotin und Gesamtbilirubin nicht bestimmt werden. Harnstoff war als einziger Parameter bei allen Tieren im Normbereich (< 8,0 mmol/l). Die Lebern wiesen bei der äußerlichen Adspektion in zwölf (N = 3 Kontrolle, N = 9 JKK-reich) Fällen eine hochgradige, in sechs (N = 3 Kontrolle, N = 3 JKK-reich) Fällen eine gering- bis mittelgradige Gallenstauung auf. Alle Tiere von JKK-reichen Flächen (100 %) und sechs Tiere von Kontrollflächen (42 %) zeigten eine mehr oder weniger ausgeprägte makroskopische Gallengangsstauung im Anschnitt. Tiere von JKK-reichen Flächen hatten im Verhältnis zu den Kontrolltieren signifikant mehr makroskopisch erfassbare, verdickte und gestaute Gallengänge (p = 0,002*). Bei keinem der Tiere wurden jedoch Veränderungen der Gallenblase beobachtet.

Im Rahmen dieses Feldversuchs wurde der potenzielle Einfluss der mehrjährigen Beweidung von Flächen mit hohem Anteil an JKK auf pathologische Veränderungen der Leber, auf klinische Blutparameter und PA-Gehalte in essbaren Geweben von extensiv gehaltenen Rindern untersucht. Um die typischen Umwelt- und Lebensbedingungen der in Deutschland gehaltenen Galloway-Robustrinder zu berücksichtigen, hatte eine möglichst realitätsnahe Haltung Vorrang. Es handelte sich um natürliche Herdenstrukturen mit wirtschaftlichem Ziel, sodass die Auswahl der Weidetiere in der Anzahl und der Einteilung (Geschlecht, Alter) eingeschränkt war. So ist es sicher kritisch zu betrachten, dass alle JKK-Tiere weiblich waren. Gleichwohl ist aus ernährungsphysiologischer Sicht nicht von einem Unterschied in der Selektion des JKK auszugehen. Der insgesamt höhere Altersdurchschnitt der JKK-Tiere (68,4 Monate) im Vergleich zu den Kontrolltieren (35,5 Monate) kann als Vorteil gesehen werden für die Ziele dieser Arbeit. Zwar konnte das Fressverhalten der Tiere in der vorliegenden Studie nicht untersucht werden; sollten die JKK-Tiere jedoch tatsächlich das JKK regelmäßig über mehrere Jahre gefressen haben, so hätte sich die akkumulierte Schadwirkung von PAs mit großer Wahrscheinlichkeit auch deutlich gezeigt. Trotzdem die beim Rind in vitro gemessene Pyrrol-Bildungsrate gering ist (Shull et al. 1976), zählen Rinder zu den relativ empfänglichen Spezies mit einer chronisch-letalen Dosis von 2,5 mg Gesamt-PA/kg Körpergewicht/Tag ermittelt über einen Zeitraum von 18 Tagen (Johnson 1978) bzw. von 5 % im Verhältnis zum Körpergewicht (Cheeke und Pierson-Goeger 1983). Des Weiteren wurde im Vorfeld davon ausgegangen, dass ein Teil der Tiere mit dem Großen Leberegel (Fasciola hepatica) befallen sein würde oder zumindest Spuren einer durchgemachten Infektion zeigen könnte. Rinder zählen zu den wichtigsten Endwirten des Parasiten und in Schleswig-Holstein muss von einer relativ hohen Prävalenz (50 %) ausgegangen werden (Deplazes et al. 2012). Die parasitologische Untersuchung sollte daher zusätzliche Aufschlüsse bei möglichen Veränderungen des Lebergewebes und der Blutwerte liefern. Als einziger signifikanter Parameter, der einen statistischen Einfluss durch das Weiden auf JKK-Flächen zeigte, sind die makroskopisch verdickten Gallengänge im Leberanschnitt zu nennen (p = 0,002*). Der Nachweis von Parasiten bzw. deren Stadien im Kot war bei den JKK-Tieren statistisch nicht häufiger als in der Kontrollgruppe. Im Fall der Magen-Darm-Strongyliden waren die Kontrolltiere sogar signifikant stärker befallen. Dennoch bleibt die wahrscheinlichste Ursache für die vorgefundenen Veränderungen der Lebern eine durchgemachte Infektion mit dem Großen Leberegel. Dass diese auch bei ausbleibendem koproskopischen Nachweis in Betracht gezogen werden muss, liegt am Lebenszyklus dieses Parasiten. Die lange Präpatenz in Verbindung mit der geringen Sensitivität des Sedimentationsverfahrens bei einmaliger Einzeltieruntersuchung (Rind 55–80 %) kann durchaus dazu beitragen, dass ein Einzeltier in der koproskopischen Untersuchung unauffällig ist (Deplazes et al. 2020). Die geschädigten großen Gallengänge und das Lebergewebe können im Verlauf von bis zu eineinhalb Jahren regenerieren, allerdings sind auch bakterielle Sekundärinfektionen möglich, welche den Schaden erheblich verstärken können und auch nach der Eliminierung der Parasiten aus dem Körper noch bestehen bleiben können. Selbst unter natürlichen Bedingungen und in Gebieten mit endemischem Leberegel-Vorkommen ist die natürliche Immunität gegenüber einer Fasciolose darüber hinaus eher gering ausgeprägt. Bei entsprechendem Parasitendruck kann es daher leicht zu immer wiederkehrenden Reinfektionen kommen (Deplazes et al. 2020). Die Ergebnisse der erhobenen Parameter deuten auf keine zusätzliche gesundheitliche Belastung von mehrjährig auf Flächen mit JKK-Bewuchs weidenden Tieren hin im Vergleich zu Tieren, die nie auf Weiden mit nachweislichem JKK-Bewuchs standen. Die genaue Bewertung einiger histopathologischer Befunde (eosinophile/lymphozytäre Hepatitis) muss im Hinblick auf Parasitendruck und die damit einhergehenden akuten und chronischen Veränderungen der Leber betrachtet werden. Bei den bei zwei Kontrolltieren vorgefundenen histopathologischen Inselbefunden ließ sich ein PA-Einfluss dadurch ausschließen, dass diese Tiere nachweislich nicht auf JKK-reichen Weiden gestanden hatten. In beiden Fällen zeigte sich keine generelle Beeinflussung des übrigen Lebergewebes. Die zu dem histopathologisch zu erwartenden Bild nach einer Pyrrolizidinintoxikation gehörenden Nekrosen (Preliasco et al. 2017) wurden ausnahmslos bei diesen Kontrolltieren festgestellt. Ihre Genese bleibt unklar. In der Fleischbeschau fehlten ebenso konkrete Anzeichen einer PA-Intoxikation wie eine gestaute Gallenblase oder fibrotische Verhärtung und Schrumpfung des Lebergewebes. Auch die Gesamtbilirubinwerte waren im Normbereich, was darauf hindeutet, dass die gefundenen Gallengangsstauungen eher isolierte, parasitär-bedingte Geschehen waren (Panter et al. 2014). Die ermittelten Schlachtgewichte (Kontrolltiere = Ø 246 kg; JKK-reich = Ø 274 kg) weisen auf einen allgemein guten Gesundheitszustand der Tiere. Die JKK-Tiere dieser Studie haben über einen Zeitraum von vier Jahren auf den JKK-Flächen gestanden und es kann nicht ausgeschlossen werden, dass einzelne Tiere JKK gefressen haben. Die im JKK enthaltenen Bitterstoffe führen aber in der Regel zu einem Lernverhalten und anschließendem Meiden der Pflanze als Futterpflanze (Cortinovis und Caloni 2015). In einer niederländischen Fütterungsstudie von Vos (Vos et al. 2002) kam es über einen Zeitraum von anderthalb Jahren bereits zu Vergiftungserscheinungen. Alle Tiere zeigten dabei massive Veränderungen in Form von Zirrhose/Fibrose mit teils klinischen Symptomen. Diese Tiere wurden im Unterschied zu den hier untersuchten Tieren direkt mit JKK-kontaminierter Grassilage gefüttert, sodass die Tiere keine Möglichkeit hatten, die PA-haltige Pflanze zu meiden. Auf Einzeltierebene wurden bei den Blutwerten vereinzelt unerhebliche Erhöhungen der Leberenzyme (z. B. Glutamatdehydrogenase) und Elektrolyte (Kalium) nachgewiesen. Für Galloway-Rinder sind Vergleichswerte nicht vorhanden, da dies ein regelmäßiges Beproben der eher scheuen Tiere voraussetzen würde. Wahrscheinlich ist jedoch, dass derartige Schwankungen Ausdruck sind einer natürlichen Auseinandersetzung mit dem wechselnden Nahrungsangebot, Hormonstatus und umweltbedingten Noxen (Wetter, Parasiten). Schließlich zeigten auch die massenspektrometrischen Untersuchungen keinen Hinweis auf eine mögliche PA-Belastung der essbaren Gewebe nach Beweidung von JKK-Flächen. Sämtliche Studien, in denen von einer Intoxikation bzw. einem Übertritt in essbare Gewebe/Milch und damit auch von einer potenziellen Verbrauchergefährdung ausgegangen werden kann, beruhen auf Fütterungsversuchen, in denen den Tieren JKK-haltiges Futter „aufgezwungen“ wurde (Pansenfistel: Craig et al. 1991, de Nijs et al. 2017; getrocknetes Futter: Dickinson et al. 1976, Hoogenboom et al. 2011).

Laut dem BfR ist eine PA-Belastung in Lebens- und Futtermitteln generell unerwünscht und sollte seitens des Lebensmittelunternehmers vermieden werden (BfR 2016), sodass im Fall von ökologischer Rinderhaltung die Frage aufkommt, ob Landwirte und Tierhalter zum Wohle der Tiergesundheit und des Verbraucherschutzes den immensen Aufwand auf sich nehmen sollten, das Jakobskreuzkraut auf ihren Flächen zu bekämpfen. Auch wenn das Fressverhaltens der Tiere in der vorliegenden Studie nicht untersucht wurde, lassen die Ergebnisse rückschließen, dass die Tiere trotz teilweise erheblichem Angebot von JKK kurz- und langfristig keine gesundheitsschädlichen Mengen gefressen haben. Es bleibt jedoch offen, über welchen Lernmechanismus sie ggf. in der Lage sind, die Pflanze dauerhaft zu meiden (Herdenstruktur, Geschmack, Geruch o. Ä.). Charakteristische Hinweise auf die Folgen einer PA-Intoxikation konnten bei keinem der JKK-Tiere nachgewiesen werden und auch die Schlachtgewichte deuten auf eine gute Allgemeingesundheit. In allen untersuchten Gewebeproben lagen die PA-Gehalte unter der Nachweisgrenze, sodass auch hier von keiner Belastung beim Verzehr des Fleisches auszugehen ist. Mit dem aufkommenden Interesse des Verbrauchers an regionalem Fleisch von Tieren aus ökologischer Haltung wird die ganzjährige Weidehaltung von Robustrindern wie sie in dieser Studie untersucht wurde, eine immer wichtigere Rolle spielen. Umso wichtiger ist daher die Feststellung, dass in dieser Form der Tierhaltung keine gesundheitliche Gefährdung durch JKK für Mensch und Tier zu befürchten ist. Vielmehr sollten die realen Gefahren des JKK in der Nutztierhaltung erkannt und gemieden werden: Da die PAs zumindest beim Trockenprozess von Mahdgut erhalten bleiben (Berendonk et al. 2010, Vandenbroucke et al. 2010, Berendonk und Hünting 2011), den Tieren die Selektion in konserviertem Futter aber weniger gut gelingt als auf der Weide, sollten Landwirte daher stets kontrollieren, von welchen Quellen bzw. Wiesen ihr Heu stammt. In dieser Studie wuchsen die Tiere in einer intakten Herdenstruktur auf, in der sie wahrscheinlich von Geburt an die Möglichkeit hatten, sich dem Fressverhalten der Gruppe anzupassen. Es ist davon auszugehen, dass Robustrinderrassen wie Galloways besser mit dem Vorkommen von giftigen Pflanzen auf der Weide zurechtkommen. Die Ergebnisse sind daher nicht auf unerfahrene Weidetiere und auf andere Rinderrassen übertragbar.

Die Autoren versichern, dass keine geschützten, beruflichen oder anderweitigen persönlichen Interessen an einem Produkt oder einer Firma bestehen, welche die in dieser Veröffentlichung genannten Inhalte oder Meinungen beeinflussen könnten.

Die Autoren versichern, während des Entstehens der vorliegenden Arbeit die allgemeingültigen Regeln guter wissenschaftlicher Praxis befolgt zu haben. Alle maßgeblichen internationalen, nationalen und/oder institutionellen ethischen Richtlinien für den Umgang mit in der Studie verwendeten Tieren wurden beachtet.

Die Arbeit wurde durch die Stiftung Naturschutz Schleswig-Holstein, Molfsee unterstützt und vom Ministerium für Energiewende, Landwirtschaft, Umwelt und ländliche Räume Schleswig-Holstein gefördert. Hierfür möchten wir uns herzlich bedanken. Die Autoren versichern, dass sie Daten hierzu auf begründete Nachfrage hin bereitstellen.“

AF, AH, MHo und SW konzipierten die Studie. AF, AH und SW waren bei den Schlachtungen vor Ort, entnahmen die Proben und bereiteten diese für die spätere Analyse auf. AF führte die makros- und mikroskopischen Untersuchungen des Lebergewebes am Schlachtbetrieb und im Labor der Pathologie der TiHo Hannover durch. Die Blutparameter wurden im Labor der TiHo Hannover untersucht und von MHo interpretiert. Die Datenanalyse aller Parameter in R übernahm MHa. Die Ergebnisse wurden von den Autorinnen und dem Autor gemeinsam interpretiert und diskutiert. AF erstellte eine erste Version des Manuskripts und die Autorinnen und die Autoren ergänzten und korrigierten den Entwurf.

Steffi Wiedemann
Hochschule Rhein-Waal
Dezernat Ressourcen, Abt. Finanzmanagement, 
Marie-Curie-Str. 1, 47533 Kleve
steffi.wiedemann@hochschule-rhein-waal.de

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