Methodische Aspekte zur Gerinnungsdiagnostik bei Vögeln unter Verwendung kommerziell erhältlicher Reagenzien – eine Pilotstudie

Berliner und Münchener Tierärztliche Wochenschrift 127, 322-327

DOI: 10.2376/0005-9366-127-322

© Schlütersche Verlagsgesellschaft mbH & Co. KG. 2014

Publiziert: 07/2014

Summary

The aim of this study was to examine the suitability of commercially available reagents for measurements of coagulation parameters in citrated plasma from birds. Therefore, plasma samples of 17 healthy donor birds of different species were used to determine prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (aPTT) and thrombin time (TT) applying various commercial reagents which are routinely used in coagulation diagnostics in humans and mammals. A PT reagent based on human placental thromboplastin yielded not only shorter clotting times than a reagent containing recombinant human tissue factor (median 49 vs. 84 s), but also showed a minor range of distribution of values (43–55 s vs. 30–147 s, minimum–maximum, n = 5 turkeys). An aPTT reagent containing kaolin and phospholipids of animal origin delivered the shortest clotting times and the lowest range of variation in comparison to three other reagents of different composition. However, even when this reagent was used, aPTTs were partially extremely long ( gt;200 s). Thrombin time was 38 s (28–57 s, n = 5 chicken) when measured with bovine thrombin at a final concentration of 2 IU thrombin/ ml. Coefficients of variation for within-run precision analysis (20 repetitions) of PT was 8.0% and 4.7% for aPTT measurements using selected reagents of mammalian origin. In conclusion, of the commercially available reagents tested, a PT reagent based on human placental thromboplastin and an aPTT reagent including rabbit brain phospholipid and kaolin, show some promise for potential use in birds.

Zusammenfassung

Das Ziel dieser Studie war es, die Verwendbarkeit verschiedener kommerziell erhältlicher Reagenzien bei der Durchführung von globalen Gerinnungstests mit Vogelplasma zu untersuchen. Zu diesem Zweck wurden in Zitratplasma von 17 gesunden Spendervögeln verschiedener Spezies die Prothrombinzeit (PT), die aktivierte partielle Thromboplastinzeit (aPTT) sowie die Thrombinzeit (TT) unter Verwendung von verschiedenen kommerziell erhältlichen Reagenzien, welche routinemäßig in der Hämostasediagnostik bei Menschen und Säugern eingesetzt werden, gemessen. Ein auf humanem plazentalem Thromboplastin basierendes Reagenz erzielte nicht nur deutlich kürzere Gerinnungszeiten als ein rekombinantes humanes Gewebsthromboplastin enthaltendes Reagenz (Median 49 vs. 84 s), sondern zeigte zudem eine deutlich geringere Streuung der Werte (43–55 s vs. 30–147 s, Minimum–Maximum, n = 5 Puten). Ein aPTT-Reagenz, welches eine Kombination aus Kaolin und einer Phospholipidquelle tierischen Ursprungs enthält, lieferte im Vergleich zu drei Reagenzien anderer Zusammensetzung die kürzesten Gerinnungszeiten und die geringste Streuung der Werte. Dennoch waren die Gerinnungszeiten selbst unter Verwendung dieses Reagenzes teilweise extrem lang ( gt; 200 s). Die Thrombinzeit belief sich, gemessen mit bovinem Thrombin in einer Konzentration von 2 IU Thrombin/ml, im Testansatz auf 38 s (28–57 s, n = 5 Hüh- ner). Der Variationskoeffizient betrug für die Intra-Assay-Präzision mit 20 Wiederholungen unter Verwendung jeweils ausgewählter Reagenzien für die Messung der PT 8,0 % und für die Messung der aPTT 4,7 %. Zusammenfassend erwiesen sich von den hier getesteten kommerziellen Reagenzien auf Säugetierbasis nur ein PT-Reagenz aus humanem rekombinantem Gewebsthromboplastin sowie ein aPTT-Reagenz, bestehend aus Kaolin und Phospholipiden tierischen Ursprungs, als vielversprechend für den potenziellen Einsatz in der aviären Hämostasediagnostik.