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KIT-Mutationsanalyse für kanine MCT

Die c-KIT-Mutations-PCR-Analyse dient der Untersuchung, ob Interne-Tandem-Duplikationen, Deletionen oder sonstige Mutationen im c-KIT-Rezeptor-Protein vorliegen.

Dieser Beitrag ist Zusatzmaterial zu folgendem Beitrag: Hunde-Mastzelltumoren

Das Vorhandensein dieser Mutationen bei kaninen Mastzelltumoren hat eine Auswirkung auf Prognose und Abschätzung der Ansprechbarkeit für Therapien mit Tyrosinkinaseinhibitoren und ist insbesondere bei Rezidiven oder Mastzelltumoren mit rapider Ausbreitung indiziert. Mittels PCR und anschließender Sequenzierung werden die Exons 8, 9, 11, 13, 14 und 17 auf Mutationen untersucht.

Die Untersuchung hat den Vorteil, dass schon bestehendes gefärbtes, auf zytologischen Objektträgern befindliches, nicht eingedecktes Material – und auch pathohistologisches Probenmaterial – analysiert werden kann und nicht ein weiteres Mal beprobt werden muss. Die zytologischen Präparate können bei ausreichendem Zellgehalt gefärbt oder ungefärbt eingesendet werden Die Analyse erfolgt direkt aus diesem Material. Bei pathohistologischem Material müssen Paraffinblöckchen oder 25 µm dicke Schnitte eingesandt werden. Ebenso können auch Proben in Einzelzellsuspension, wie für die Durchflusszytometrie zur Immunphänotypisierung von Lymphomen, verwendet werden. Dabei wird das Material der Feinnadelaspiration in Eppendorffcups gespritzt. Diese Pufferbehälter können im Labor angefordert werden.

Die Analyse wird im Zentrallabor der Vetmeduni Vienna alle zwei Wochen mit einer „turn around“ Zeit von 14 Tagen durchgeführt. Sie kostet für zytologische Ausstrichproben 180 Euro, für die Analyse aus Paraffinmaterial 190 Euro.

Kontakt: Dr. Barbara Rütgen, Zentrallabor Vetmeduni

Telefon: +43 1 25077 6793

barbara.ruetgen@vetmeduni.ac.at


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Literatur

DeVinney, R. & Gold, W.M. Establishment of two dog mastocytoma cell lines in continuous culture. American journal of respiratory cell and molecular biology 3, 413– 420 (1990).
Gentilini, F., Mantovani, V. & Turba, M.E. The use of COLD-PCR, DHPLC and GeneScanning for the highly sensitive detection of c-KIT somatic mutations in canine mast cell tumours. Veterinary and comparative oncology 13, 218–228 (2015). 
Gregory-Bryson, E., Bartlett, E., Kiupel, M., Hayes, S. & Yuzbasiyan-Gurkan, V. Canine and human gastrointestinal stromal tumors display similar mutations in c-KIT exon 11. BMC Cancer 10, 559 (2010).   
Jones, C.L.R., Grahn, R.A., Chien, M.B., Lyons, L.A. & London, C.A. Detection of c-kit mutations in canine mast cell tumors using fluorescent polyacrylamide gel electrophoresis. Journal of veterinary diagnostic investigation: official publication of the American Association of Veterinary Laboratory Diagnosticians, Inc 16, 95–100 (2004). 
Marconato, L. et al. Concordance of c-kit mutational status in matched primary and metastatic cutaneous canine mast cell tumors at baseline. Journal of veterinary internal medicine / American College of Veterinary Internal Medicine 28, 547–553 (2014). 
Tamura, K. et al. Development of the polymerase chain reaction assay based on the canine genome database for detection of monoclonality in B cell lymphoma. Veterinary Immunology and Immunopathology 110 (2006) 163-167.