Berliner und Münchener Tierärztliche Wochenschrift 124, 154-160

DOI: 10.2376/0005-9366-124-154

© Schlütersche Verlagsgesellschaft mbH & Co. KG. 2011

Publiziert: 03/2011

Summary

Proinflammatoric cytokines are released extracellularly during necrosis. These leadto inflammation and destruction of surrounding tissues. The aim of this study wasto compare the number of viable, apoptotic and necrotic cells in the bronchoalveolarlavage fluid (BALF) of normal horses and horses with recurrent airwayobstruction (RAO) and to determine if fluorescence microscopy is a reliablemethod for this examination.

A group of six normal horses and a group of ten horses with RAO were examined.Samples were assessed using annexin-V and propidium iodide immunofluorescenceassay and examined by fluorescence microscopy (16 horses) and flowcytometry (nine of 16 horses).

We found no significant differences in percentages of apoptotic and viable cellsbetween both groups. The number of necrotic cells was significantly increased inhorses with RAO counted by fluorescence microscopy. Cells with high granularityand macrophages had a significantly higher percentage of necrotic cellsthan lymphocytes. There was a good agreement between both methods. Nosignificant differences were detected. The correlation between both methods issignificant.

Higher amounts of necrotic cells in the bronchial lumina of horses with RAOcould be a reason for tissue damage and continuous lung tissue inflammation.Fluorescence microscopy was applicable for examination of BALF. Therapy shouldbe aimed at the reduction of necrotic cells in the bronchial lumina. Further studiesare required to find ways to reduce inflammatory cell infiltration and necrosisin bronchial lumina.

Zusammenfassung

Proinflammatorische Zytokine werden während der Nekrose in den Extrazellulärraumabgegeben. Dies führt zur Entzündung und Zerstörung des umliegendenGewebes. Ziel dieser Studie war es, die Anzahl vitaler, apoptotischer und nekrotischerZellen in der Bronchoalveolären-Lavage–Flüssigkeit (BALF) bei gesundenPferden und Pferden mit Recurrent Airway Obstruction (RAO) zu vergleichen.Außerdem sollte herausgefunden werden, ob die Fluoreszenzmikroskopie eineverlässliche Methode für diese Untersuchung ist.

Eine Gruppe von sechs gesunden Pferden sowie eine Gruppe von zehn Pferdenmit RAO wurden untersucht. Annexin-V und Propidiumjodid wurden für dieUntersuchung der Proben eingesetzt. Dabei wurden alle Proben (n = 16) mittelsFluoreszenzmikroskopie ausgewertet, neun der 16 Proben zusätzlich mittelsDurchflusszytometrie.

Es gab keine signifikanten Unterschiede in den Prozentsätzen der apoptotischenund vitalen Zellen zwischen beiden Gruppen. Die Anzahl der nekrotischen Zellenwar bei der Auswertung mittels Fluoreszenzmikroskopie bei Pferden mit RAO signifikant erhöht. Granuläre Zellen und Makrophagen hatten in beiden Gruppeneinen signifikant höheren Prozentsatz nekrotischer Zellen als Lymphozyten.Es lag eine gute Übereinstimmung zwischen den beiden Untersuchungsmethodenvor, signifikante Unterschiede konnten nicht entdeckt werden. Die Korrelationzwischen beiden Methoden war signifikant.

Eine Erhöhung der nekrotischen Zellen im Bronchiallumen von Pferden förderteine Gewebeschädigung und die Aufrechterhaltung einer Entzündung des Lungengewebes.Die Fluoreszenzmikrokopie kann für die Untersuchung von BALFgenutzt werden. Die Therapie der RAO sollte zu einer Reduktion der nekrotischenZellen in der Lunge führen. Weitere Studien sind notwendig, um Möglichkeitenzur Verminderung der inflammatorischen Zellinfiltration und Nekrose imBronchiallumenzu finden.