Brucella melitensis, sheep, PCR, bacteriological culture, RBPT, Brucella melitensis, Schafe, PCR, bakteriologische Kultur, RBPT

Berliner und Münchener Tierärztliche Wochenschrift 114, 460-464

DOI: 10.2377/0341-6593-114-460

© M. & H. Schaper GmbH. 2007

Publiziert: 12/2007

Summary

The aim of this study was to evaluate the polymerase chain reaction (PCR) assayfor detection of Brucella melitensis in stomach content samples of aborted sheepfetuses and to compare its performance with bacteriological culture method.It was also aimed to determine the agreement between PCR and Rose Bengalplate test (RBPT). Materials were collected from aborted sheep from 109 differentsheep flocks in the region of Van during the lambing seasons of 2004–2005 and2005–2006. Stomach contents from 135 aborted sheep fetuses were examinedby bacteriological culture and PCR, and 135 sera from these aborting ewes weretested by RBPT. Identification and typing of Brucella strains were performed usingstandard classification test. B. melitensis biovar 3 was isolated from 26 (19.2 %) offoetal stomach contents. B. melitensis was detected by PCR in 29 (21.4 %) stomachcontent samples. Twenty five sera (18.5 %) from aborting ewes tested positiveby RBPT. The detection limit of B. melitensis 16 M strain by PCR was 1.7 x 103 cfu(colony forming units) /ml in spiked stomach contents. Diagnostic sensitivity andspecificity of the PCR were detected as 100 % and 97.2 %, respectively. The agreementbetween PCR and RBPT was found to be 97 %. In conclusion, PCR assaywould have an advantage over conventional bacteriological culture method, butin particular for its ability to meet the specificity requirements for the detection ofB. melitensis in stomach content samples of aborted sheep fetuses.

Zusammenfassung

Das Ziel dieser Studie war, Ergebnisse der Polymerase Kettenreaktion (PCR) aufBrucella melitensis im Mageninhalt abortierter Schaffeten auszuwerten und mitden Ergebnissen der bakteriologischen Kulturmethode zu vergleichen bzw. dieÜbereinstimmung zwischen PCR und Rose Bengal Test (RBPT) zu überprüfen.Abortierte Feten aus der Region Van aus 109 unterschiedlichen Schaf-Herdengelangten während der Lammzeiten von 2004–2005 und von 2005–2006 zurUntersuchung. Der Mageninhalt von 135 abortierten Schaffeten wurden kulturellsowie mittels PCR untersucht. Von 135 Müttern mit Aborten wurden Blutprobenmittels RBPT serologisch untersucht. Die kulturelle Untersuchung und Typisierungenwurden mit Standardklassifikationtests durchgeführt und B. melitensisbiovar 3 wurde im Mageninhalt von 26 (19.2 %) der Proben nachgewiesen.B. melitensis wurde mittels PCR in 29 (21.4 %) Proben des Mageninhalts ermittelt.25 Seren (18.5 %) reagierten im RBPT positiv. Die Nachweisgrenze des aufB. melitensis 16 M Stammes mittels PCR war 1.7 x 103 Kolonie bildende Einheiten(KBE)/ml im gespikten Mageninhalt. Sensitivität und Spezifität der PCR wurdenmit 100 % bzw. 97.2 % ermittelt. Die Übereinstimmung zwischen PCR und RBPT lagbei 97 %. Die PCR ist aufgrund dieser Ergebnisse der kulturellen Untersuchungüberlegen, insbesondere aufgrund der hohen Spezifität beim Nachweis vonB. melitensis im Mageninhalt abortierter Feten.