Berliner und Münchener Tierärztliche Wochenschrift 124, 288-294

DOI: 10.2376/0005-9366-124-288

© Schlütersche Verlagsgesellschaft mbH & Co. KG. 2011

Publiziert: 07/2011

Zusammenfassung

Seit dem Jahr 2006 führt das Auftreten der Blauzungenkrankheit in NordwestundZentraleuropa zu beträchtlichen wirtschaftlichen Schäden. Als first-lineDiagnostik wird zunehmend die Reverse Transkription Real-time PCR (RT-qPCR)eingesetzt, was eine sorgfältige Evaluierung der verwendeten Methoden durchdas durchführende Labor bedeutsam macht. Im Rahmen einer internen Validierungwurden vier kommerziell erhältliche BTV RT-qPCR Screening kits und zweipublizierte Methoden verglichen. Es zeigten sich zum Teil deutliche Unterschiedein Reaktionskinetik, analytischer und diagnostischer Sensitivität, Spezifität, sowiein der Eignung der Testkits für die Anwendung bei ausgewählten BTV-empfänglichenWirtsspezies. Nur zwei der kommerziellen Kits waren in allen untersuchtenParametern den technisch aufwendigeren Referenzmethoden ebenbürtig odersogar überlegen und stellen daher eine Alternative zum BTV RT-qPCR Screeningmit publizierten Methoden dar.

Summary

Since 2006, the occurrence of bluetongue in Northwest- and Central Europehas lead to extensive financial losses. For first-line laboratory diagnosis, reversetranscription real-time PCR (RT-qPCR) has been used increasingly, necessitatingcareful evaluation of all applied methods by the performing laboratory. In thecourse of an internal validation, four commercially available BTV RT-qPCR kits andtwo published reference methods were compared. Clear differences regardingreaction kinetics, analytical as well as diagnostic sensitivity and specificity wereobserved. Furthermore, test kits were not equally suitable for testing samplesfrom a selection of BTV-susceptible host species. Only two commercial kits werein all examined parameters equal to, or superior than, the more demandingreference methods and thus represent a possible alternative to using publishedmethods for BTV RT-qPCR screening.