Vergleichende Evaluierung der Eignung von Serum, auf FTA® Filter getrocknetem Blut und oraler Flüssigkeit als Probenmaterialien für die PRRSV-Diagnostik mittels RT-qPCR anhand einer experimentellen Studie im kleinen Maßstab

Berliner und Münchener Tierärztliche Wochenschrift 127, 216-221

DOI: 10.2376/0005-9366-127-216

© Schlütersche Verlagsgesellschaft mbH & Co. KG. 2014

Publiziert: 06/2014

Summary

Recently, research into alternative sample materials, such as oral fluid or filter-dried blood has been intensified, in order to facilitate cost-effective and animal-friendly sampling of individuals or groups of pigs for diagnostic purposes. The objective of this study was to compare the sensitivity of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV)-RNA detection by reverse transcription quantitative realtime PCR (RT-qPCR) in serum, FTA® filter-dried blood and oral fluid sampled from individual pigs. Ten PRRSV negative pigs were injected with an EU-type PRRSV live vaccine. Blood and oral fluid samples were taken from each pig before, and 4, 7, 14 and 21 days after vaccination. All samples were then analyzed by PRRSV RT-qPCR. In serum, eight of ten pigs tested RT-qPCR positive at different time points post infection. Absolute quantification showed low serum PRRSV-RNA loads in most samples. In comparison to serum, sensitivity of PRRSV-RNA detection was strongly reduced in matched FTA® filter-dried blood and in oral fluid from the same pigs. These results indicate that with low PRRSV-RNA loads the diagnostic sensitivity of PRRSV-RNA detection by RT-qPCR achieved with serum is currently unmatched by either FTA® filter-dried blood or oral fluid.

Zusammenfassung

Die Erforschung alternativer Probenmaterialien wurde in letzter Zeit sehr intensiv betrieben, um eine kosteneffiziente und tierfreundliche Beprobung von Einzeltieren oder Gruppen von Schweinen zu diagnostischen Zwecken zu ermöglichen. Das Ziel der vorliegenden Studie war es, die Sensitivität des Nachweises von RNA des PRRS-Virus (PRRS – Porzine Reproduktive und Respiratorische Syndrom) mittels Reverse Transkriptase quantitative real-time PCR (RT-qPCR) in Serum, auf FTA® Filter getrocknetem Blut sowie oraler Flüssigkeit von einzelnen Schweinen zu vergleichen. Zehn PRRSV-negative Schweine wurden dazu mit einer PRRSV-Lebendvakzine vom EU-Typ inokuliert. Blut und orale Flüssigkeit wurden von jedem Schwein vor sowie 4, 7, 14 und 21 Tage nach Impfung entnommen. Danach wurden alle Proben mittels PRRSV RT-qPCR untersucht. Im Serum von acht dieser zehn Schweine wurde zu verschiedenen Zeitpunkten nach Impfung PRRSV-RNA nachgewiesen. Eine absolute Quantifizierung zeigte niedrige Serum-PRRSV-RNA-Lasten in den meisten Proben. Im Vergleich zu Serum war die Sensitivität des PRRSV-Nachweises in auf FTA® Filter getrocknetem Blut und oraler Flüssigkeit derselben Schweine stark vermindert. Diese Ergebnisse zeigen, dass bei niedrigen PRRSV-RNA-Lasten die diagnostische Sensitivität von Serum als Probenmaterial derzeit mit auf FTA® Filter getrocknetem Blut oder oraler Flüssigkeit nicht erreicht wird.