TY - JOUR AU - M Höltershinken AU - A Höhling AU - B Witte AU - H Scholz AB - In der vorliegenden Arbeit wurde geprüft, ob die direkte Messung von Thiamin und seinen Derivaten im Blut möglich und geeignet ist, um den aufwendigen Transketolasetest in der Diagnostik der Vitamin B,-Versorgung von Rindern zu ersetzen. Hierzu wurden Thiamin sowie Thiamindiphosphat (TDP) und Thiamin-monophosphat (TMP) durch Auftrennung mittels HPLC-Technik über Nachsäu-lenderivatisierung im Rinderblut bestimmt und klinischen Befunden in unverdächtigen Betrieben und solchen mit CCN-Patienten gegenüber gestellt. In Vorversuchen konnte geklärt werden, dass für diese Analysen EDTA-Vollblut am besten geeignet ist. Es darf bei 6 oder auch 20 °C bis zu 10Tage gelagert werden. Sensitivität und Spezifität waren als überdurchschnittlich gut einzuschätzen und sind denen anderer Verfahren (insbesondere dem Transketolasetest) deutlich überlegen. Die Variationskoeffizienten fürdie klinisch interessanten Parameter TDP und Gesamtthiamingehalt (Summe aller Fraktionen) lagen bei 1,95 % und 2,10 %, fürThiamin und TMP bei 7,02 % und 9,17 %. Die untere Nachweisgrenze betrug 0,5 ng/ml. Das Verfahren war gut für die Anforderungen aus der Praxis geeignet (täglich bis zu 72 Proben analysierbar). Aus Blutproben von 280 gesunden Rindern (A),201 CCN-Kohortentieren (B) und 12 CCN-Patienten (C) konnten folgende Mittelwerte für die Konzentrationen (ng/ml) von Thiamin und seinen Derivaten sowie deren 95 %-Bereich berechnet werden, die sich gruppencharakteristisch deutlich voneinander unterschieden und eine Einschätzung des Erkrankungsrisikos erlaubten: (A) Thiamin 13,5 (4,61-28,8),TDP 51,0 (33,1-82,2),TMP 8,79 (2,23-18,1 ),Gesamtthiamin 73,3 (44,6-114); (B) Thiamin 8,73 (0,00-20,0),TDP 43,5 (15,5-75,7),TMP 6,15 (0,00-16,6), Gesamtthiamin 58,4 (18,7-96,5); (C) Thiamin 3,85 (0,00-11,5),TDP 14,5 (0,00-28,3),TMP 1,27 (0,00-4,87), Gesamtthiamin 19,6 (4,92-35,9). Somit steht mit der HPLC-Analyse mit Nachsäulenderivatisierung ein präzises, weitgehend automatisierbares Meßverfahren zur raschen Diagnose eines Vitamin Bl-Mangels zur Verfügung. Als kritischer unterer Normwert für gesunde Tiere lässt sich für den Gesamtthiamingehalt im Blut 40 ng/ml angeben. Das Probenmaterial (EDTA-Vollblut) kann bei bis zu 20 °C versandt werden. Im Gegensatz zu bisherigen Analyseverfahren ermöglichtes in CCN-gefährdeten Herden eine frühzeitige und rasche Abschätzung des Erkrankungsrisikos allerTiere. BT - Berliner und Münchener Tierärztliche Wochenschrift C1 - {"oldId":71183,"title":"Analyse von Vitamin B1 und dessen Derivaten im Rinderblut mittels HPLC-Technik bei gesunden, an CCN erkrankten Tieren und deren Kohorten","teaserText":"DOI 10.2377\/0341-6593-114-212","content":"

Zusammenfassung<\/span>
In der vorliegenden Arbeit wurde gepr\u00fcft, ob die direkte Messung von Thiamin und seinen Derivaten im Blut m\u00f6glich und geeignet ist, um den aufwendigen Transketolasetest in der Diagnostik der Vitamin B,-Versorgung von Rindern zu ersetzen. Hierzu wurden Thiamin sowie Thiamindiphosphat (TDP) und Thiamin-monophosphat (TMP) durch Auftrennung mittels HPLC-Technik \u00fcber Nachs\u00e4u-lenderivatisierung im Rinderblut bestimmt und klinischen Befunden in unverd\u00e4chtigen Betrieben und solchen mit CCN-Patienten gegen\u00fcber gestellt. In Vorversuchen konnte gekl\u00e4rt werden, dass f\u00fcr diese Analysen EDTA-Vollblut am besten geeignet ist. Es darf bei 6 oder auch 20 \u00b0C bis zu 10Tage gelagert werden. Sensitivit\u00e4t und Spezifit\u00e4t waren als \u00fcberdurchschnittlich gut einzusch\u00e4tzen und sind denen anderer Verfahren (insbesondere dem Transketolasetest) deutlich \u00fcberlegen. Die Variationskoeffizienten f\u00fcrdie klinisch interessanten Parameter TDP und Gesamtthiamingehalt (Summe aller Fraktionen) lagen bei 1,95 % und 2,10 %, f\u00fcrThiamin und TMP bei 7,02 % und 9,17 %. Die untere Nachweisgrenze betrug 0,5 ng\/ml. Das Verfahren war gut f\u00fcr die Anforderungen aus der Praxis geeignet (t\u00e4glich bis zu 72 Proben analysierbar). Aus Blutproben von 280 gesunden Rindern (A),201 CCN-Kohortentieren (B) und 12 CCN-Patienten (C) konnten folgende Mittelwerte f\u00fcr die Konzentrationen (ng\/ml) von Thiamin und seinen Derivaten sowie deren 95 %-Bereich berechnet werden, die sich gruppencharakteristisch deutlich voneinander unterschieden und eine Einsch\u00e4tzung des Erkrankungsrisikos erlaubten: (A) Thiamin 13,5 (4,61-28,8),TDP 51,0 (33,1-82,2),TMP 8,79 (2,23-18,1 ),Gesamtthiamin 73,3 (44,6-114); (B) Thiamin 8,73 (0,00-20,0),TDP 43,5 (15,5-75,7),TMP 6,15 (0,00-16,6), Gesamtthiamin 58,4 (18,7-96,5); (C) Thiamin 3,85 (0,00-11,5),TDP 14,5 (0,00-28,3),TMP 1,27 (0,00-4,87), Gesamtthiamin 19,6 (4,92-35,9). Somit steht mit der HPLC-Analyse mit Nachs\u00e4ulenderivatisierung ein pr\u00e4zises, weitgehend automatisierbares Me\u00dfverfahren zur raschen Diagnose eines Vitamin Bl-Mangels zur Verf\u00fcgung. Als kritischer unterer Normwert f\u00fcr gesunde Tiere l\u00e4sst sich f\u00fcr den Gesamtthiamingehalt im Blut 40 ng\/ml angeben. Das Probenmaterial (EDTA-Vollblut) kann bei bis zu 20 \u00b0C versandt werden. Im Gegensatz zu bisherigen Analyseverfahren erm\u00f6glichtes in CCN-gef\u00e4hrdeten Herden eine fr\u00fchzeitige und rasche Absch\u00e4tzung des Erkrankungsrisikos allerTiere.


Summary<\/span>
The aim of this project was to develop a routine method to measure thiamine and its derivates in blood, to detect the need of vitamin B,-supply in cattle faster and more precise than until now using the transketolase test. For that, thiamine and its derivates (thiaminediphosphate =TDP,-monophosphate =TMP) were analysed in cattle blood by HPLC technigue with post-column derivatization. Moreover, the levels in healthy cattle were compared with those in herds with Single CCN cases. EDTA-blood-stored up to 10 days by 6 or 20 \u00b0C- was the most appropriate Substrate. Sensitivitiy and specifity were significantly better than those of other methods - particularly of the transketolase test.The VCs for the diagnostically important parameters were as follows:TDP and total thiamine(TT, sum of all fractions): 1.95 % and 2.10%; thiamine and TMP: 7.02 % and 9.17 %.The lowest concentration, which could be measured, was 0.5 ng\/ml. 72 samples could be analysed daily. In the blood of 280 healthy calves and cows (group A), 201 clinically unsuspicious animals out of Stocks with Single cases of CCN (group B) and 12 patients with clinical obvious CCN (group C), thiamine and its phosphates were measured and the means calculated (ng\/ml). After this, the thiamine Status is characterized by (ng\/ml): (A) thiamine 13.5 (4.61-28.8),TDP 51.0 (33.1-82.2),TMP 8.79 (2.23-18.1),TT 73.3 (44.6-114); (B) thiamine 8.73 (0.00-20.0), TDP 43.5 (15.5-75.7),TMP 6.15 (0.00-16.6),TT 59.4 (18.7-96.5); (C) thiamine 3.85 (0.00-11.5),TDP 14.5 (0.00-28.3),TMP 1.27 (0.00-4.87),TTP 19.6 (4.92-35.9). So, HPLC with post-column derivatization offers a precise,automatically working method for a fast diagnose of thiamine deficiency.The lowest critical value of TT is 40 ng\/ml for healthy animals in the blood.The sample (EDTA-blood) can be posted simply at temperatures up to 20 \u00b0C. In comparison to other measuring methods, this HPLC-technigue enables an early recognition of the risk to come down with CCN in endangered cattle herds.<\/p>","categories":["Tier\u00e4rztliche Wochenschrift","Abostufe BMTW","Fachartikel"],"fromDate":"Jun 1, 2007 12:00:00 AM","toDate":"Dec 31, 2050 12:00:00 AM","oldUrls":["http:\/\/vetline.de\/rinderblut-hplc-technik\/150\/3130\/71183"],"doiLanguage":"deutsch","doiProductFormat":"Online","doiPublisher":"M. & H. Schaper GmbH","doiSerialWorkTitle":"Dtsch.tier\u00e4rztl.Wschr.","doiDocumentUri":"http:\/\/www.vetline.de\/rinderblut-hplc-technik\/150\/3130\/71183","doiSource":"Dtsch.tier\u00e4rztl.Wschr. 114: 6, 212-218 (2007)","doiissn":"0341-6593","doiNr":"10.2377\/0341-6593-114-212","doiFirstPage":"212","doiLastPage":"218","doiTransmitted":true,"doiAuthor":"H\u00d6LTERSHINKEN M, H\u00d6HLING A, WITTE B, SCHOLZ H","pdf":{"path":"http:\/\/data\/dtw_2007_06_0212.pdf","title":"dtw_2007_06_0212.pdf","description":"Analyse von Vitamin B1 und dessen Derivaten im Rinderblut mittels HPLC-Technik bei gesunden, an CCN erkrankten Tieren und deren Kohorten

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Zusammenfassung<\/strong>
In der vorliegenden Arbeit wurde gepr\u00fcft, ob die direkte Messung von Thiamin und seinen Derivaten im Blut m\u00f6glich und geeignet ist, um den aufwendigen Transketolasetest in der Diagnostik der Vitamin B,-Versorgung von Rindern zu ersetzen. Hierzu wurden Thiamin sowie Thiamindiphosphat (TDP) und Thiamin-monophosphat (TMP) durch Auftrennung mittels HPLC-Technik \u00fcber Nachs\u00e4u-lenderivatisierung im Rinderblut bestimmt und klinischen Befunden in unverd\u00e4chtigen Betrieben und solchen mit CCN-Patienten gegen\u00fcber gestellt. In Vorversuchen konnte gekl\u00e4rt werden, dass f\u00fcr diese Analysen EDTA-Vollblut am besten geeignet ist. Es darf bei 6 oder auch 20 \u00b0C bis zu 10Tage gelagert werden. Sensitivit\u00e4t und Spezifit\u00e4t waren als \u00fcberdurchschnittlich gut einzusch\u00e4tzen und sind denen anderer Verfahren (insbesondere dem Transketolasetest) deutlich \u00fcberlegen. Die Variationskoeffizienten f\u00fcrdie klinisch interessanten Parameter TDP und Gesamtthiamingehalt (Summe aller Fraktionen) lagen bei 1,95 % und 2,10 %, f\u00fcrThiamin und TMP bei 7,02 % und 9,17 %. Die untere Nachweisgrenze betrug 0,5 ng\/ml. Das Verfahren war gut f\u00fcr die Anforderungen aus der Praxis geeignet (t\u00e4glich bis zu 72 Proben analysierbar). Aus Blutproben von 280 gesunden Rindern (A),201 CCN-Kohortentieren (B) und 12 CCN-Patienten (C) konnten folgende Mittelwerte f\u00fcr die Konzentrationen (ng\/ml) von Thiamin und seinen Derivaten sowie deren 95 %-Bereich berechnet werden, die sich gruppencharakteristisch deutlich voneinander unterschieden und eine Einsch\u00e4tzung des Erkrankungsrisikos erlaubten: (A) Thiamin 13,5 (4,61-28,8),TDP 51,0 (33,1-82,2),TMP 8,79 (2,23-18,1 ),Gesamtthiamin 73,3 (44,6-114); (B) Thiamin 8,73 (0,00-20,0),TDP 43,5 (15,5-75,7),TMP 6,15 (0,00-16,6), Gesamtthiamin 58,4 (18,7-96,5); (C) Thiamin 3,85 (0,00-11,5),TDP 14,5 (0,00-28,3),TMP 1,27 (0,00-4,87), Gesamtthiamin 19,6 (4,92-35,9). Somit steht mit der HPLC-Analyse mit Nachs\u00e4ulenderivatisierung ein pr\u00e4zises, weitgehend automatisierbares Me\u00dfverfahren zur raschen Diagnose eines Vitamin Bl-Mangels zur Verf\u00fcgung. Als kritischer unterer Normwert f\u00fcr gesunde Tiere l\u00e4sst sich f\u00fcr den Gesamtthiamingehalt im Blut 40 ng\/ml angeben. Das Probenmaterial (EDTA-Vollblut) kann bei bis zu 20 \u00b0C versandt werden. Im Gegensatz zu bisherigen Analyseverfahren erm\u00f6glichtes in CCN-gef\u00e4hrdeten Herden eine fr\u00fchzeitige und rasche Absch\u00e4tzung des Erkrankungsrisikos allerTiere.


Summary<\/strong>
The aim of this project was to develop a routine method to measure thiamine and its derivates in blood, to detect the need of vitamin B,-supply in cattle faster and more precise than until now using the transketolase test. For that, thiamine and its derivates (thiaminediphosphate =TDP,-monophosphate =TMP) were analysed in cattle blood by HPLC technigue with post-column derivatization. Moreover, the levels in healthy cattle were compared with those in herds with Single CCN cases. EDTA-blood-stored up to 10 days by 6 or 20 \u00b0C- was the most appropriate Substrate. Sensitivitiy and specifity were significantly better than those of other methods - particularly of the transketolase test.The VCs for the diagnostically important parameters were as follows:TDP and total thiamine(TT, sum of all fractions): 1.95 % and 2.10%; thiamine and TMP: 7.02 % and 9.17 %.The lowest concentration, which could be measured, was 0.5 ng\/ml. 72 samples could be analysed daily. In the blood of 280 healthy calves and cows (group A), 201 clinically unsuspicious animals out of Stocks with Single cases of CCN (group B) and 12 patients with clinical obvious CCN (group C), thiamine and its phosphates were measured and the means calculated (ng\/ml). After this, the thiamine Status is characterized by (ng\/ml): (A) thiamine 13.5 (4.61-28.8),TDP 51.0 (33.1-82.2),TMP 8.79 (2.23-18.1),TT 73.3 (44.6-114); (B) thiamine 8.73 (0.00-20.0), TDP 43.5 (15.5-75.7),TMP 6.15 (0.00-16.6),TT 59.4 (18.7-96.5); (C) thiamine 3.85 (0.00-11.5),TDP 14.5 (0.00-28.3),TMP 1.27 (0.00-4.87),TTP 19.6 (4.92-35.9). So, HPLC with post-column derivatization offers a precise,automatically working method for a fast diagnose of thiamine deficiency.The lowest critical value of TT is 40 ng\/ml for healthy animals in the blood.The sample (EDTA-blood) can be posted simply at temperatures up to 20 \u00b0C. In comparison to other measuring methods, this HPLC-technigue enables an early recognition of the risk to come down with CCN in endangered cattle herds.<\/p>","primaryLanguage":"deutsch","zusammenfassung":"In der vorliegenden Arbeit wurde gepr\u00fcft, ob die direkte Messung von Thiamin und seinen Derivaten im Blut m\u00f6glich und geeignet ist, um den aufwendigen Transketolasetest in der Diagnostik der Vitamin B,-Versorgung von Rindern zu ersetzen. Hierzu wurden Thiamin sowie Thiamindiphosphat (TDP) und Thiamin-monophosphat (TMP) durch Auftrennung mittels HPLC-Technik \u00fcber Nachs\u00e4u-lenderivatisierung im Rinderblut bestimmt und klinischen Befunden in unverd\u00e4chtigen Betrieben und solchen mit CCN-Patienten gegen\u00fcber gestellt. In Vorversuchen konnte gekl\u00e4rt werden, dass f\u00fcr diese Analysen EDTA-Vollblut am besten geeignet ist. Es darf bei 6 oder auch 20 \u00b0C bis zu 10Tage gelagert werden. Sensitivit\u00e4t und Spezifit\u00e4t waren als \u00fcberdurchschnittlich gut einzusch\u00e4tzen und sind denen anderer Verfahren (insbesondere dem Transketolasetest) deutlich \u00fcberlegen. Die Variationskoeffizienten f\u00fcrdie klinisch interessanten Parameter TDP und Gesamtthiamingehalt (Summe aller Fraktionen) lagen bei 1,95 % und 2,10 %, f\u00fcrThiamin und TMP bei 7,02 % und 9,17 %. Die untere Nachweisgrenze betrug 0,5 ng\/ml. Das Verfahren war gut f\u00fcr die Anforderungen aus der Praxis geeignet (t\u00e4glich bis zu 72 Proben analysierbar). Aus Blutproben von 280 gesunden Rindern (A),201 CCN-Kohortentieren (B) und 12 CCN-Patienten (C) konnten folgende Mittelwerte f\u00fcr die Konzentrationen (ng\/ml) von Thiamin und seinen Derivaten sowie deren 95 %-Bereich berechnet werden, die sich gruppencharakteristisch deutlich voneinander unterschieden und eine Einsch\u00e4tzung des Erkrankungsrisikos erlaubten: (A) Thiamin 13,5 (4,61-28,8),TDP 51,0 (33,1-82,2),TMP 8,79 (2,23-18,1 ),Gesamtthiamin 73,3 (44,6-114); (B) Thiamin 8,73 (0,00-20,0),TDP 43,5 (15,5-75,7),TMP 6,15 (0,00-16,6), Gesamtthiamin 58,4 (18,7-96,5); (C) Thiamin 3,85 (0,00-11,5),TDP 14,5 (0,00-28,3),TMP 1,27 (0,00-4,87), Gesamtthiamin 19,6 (4,92-35,9). Somit steht mit der HPLC-Analyse mit Nachs\u00e4ulenderivatisierung ein pr\u00e4zises, weitgehend automatisierbares Me\u00dfverfahren zur raschen Diagnose eines Vitamin Bl-Mangels zur Verf\u00fcgung. Als kritischer unterer Normwert f\u00fcr gesunde Tiere l\u00e4sst sich f\u00fcr den Gesamtthiamingehalt im Blut 40 ng\/ml angeben. Das Probenmaterial (EDTA-Vollblut) kann bei bis zu 20 \u00b0C versandt werden. Im Gegensatz zu bisherigen Analyseverfahren erm\u00f6glichtes in CCN-gef\u00e4hrdeten Herden eine fr\u00fchzeitige und rasche Absch\u00e4tzung des Erkrankungsrisikos allerTiere.","summary":"The aim of this project was to develop a routine method to measure thiamine and its derivates in blood, to detect the need of vitamin B,-supply in cattle faster and more precise than until now using the transketolase test. For that, thiamine and its derivates (thiaminediphosphate =TDP,-monophosphate =TMP) were analysed in cattle blood by HPLC technigue with post-column derivatization. Moreover, the levels in healthy cattle were compared with those in herds with Single CCN cases. EDTA-blood-stored up to 10 days by 6 or 20 \u00b0C- was the most appropriate Substrate. Sensitivitiy and specifity were significantly better than those of other methods - particularly of the transketolase test.The VCs for the diagnostically important parameters were as follows:TDP and total thiamine(TT, sum of all fractions): 1.95 % and 2.10%; thiamine and TMP: 7.02 % and 9.17 %.The lowest concentration, which could be measured, was 0.5 ng\/ml. 72 samples could be analysed daily. In the blood of 280 healthy calves and cows (group A), 201 clinically unsuspicious animals out of Stocks with Single cases of CCN (group B) and 12 patients with clinical obvious CCN (group C), thiamine and its phosphates were measured and the means calculated (ng\/ml). After this, the thiamine Status is characterized by (ng\/ml): (A) thiamine 13.5 (4.61-28.8),TDP 51.0 (33.1-82.2),TMP 8.79 (2.23-18.1),TT 73.3 (44.6-114); (B) thiamine 8.73 (0.00-20.0), TDP 43.5 (15.5-75.7),TMP 6.15 (0.00-16.6),TT 59.4 (18.7-96.5); (C) thiamine 3.85 (0.00-11.5),TDP 14.5 (0.00-28.3),TMP 1.27 (0.00-4.87),TTP 19.6 (4.92-35.9). So, HPLC with post-column derivatization offers a precise,automatically working method for a fast diagnose of thiamine deficiency.The lowest critical value of TT is 40 ng\/ml for healthy animals in the blood.The sample (EDTA-blood) can be posted simply at temperatures up to 20 \u00b0C. 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Sensitivit\u00e4t und Spezifit\u00e4t waren als \u00fcberdurchschnittlich gut einzusch\u00e4tzen und sind denen anderer Verfahren (insbesondere dem Transketolasetest) deutlich \u00fcberlegen. Die Variationskoeffizienten f\u00fcrdie klinisch interessanten Parameter TDP und Gesamtthiamingehalt (Summe aller Fraktionen) lagen bei 1,95 % und 2,10 %, f\u00fcrThiamin und TMP bei 7,02 % und 9,17 %. Die untere Nachweisgrenze betrug 0,5 ng\/ml. Das Verfahren war gut f\u00fcr die Anforderungen aus der Praxis geeignet (t\u00e4glich bis zu 72 Proben analysierbar). Aus Blutproben von 280 gesunden Rindern (A),201 CCN-Kohortentieren (B) und 12 CCN-Patienten (C) konnten folgende Mittelwerte f\u00fcr die Konzentrationen (ng\/ml) von Thiamin und seinen Derivaten sowie deren 95 %-Bereich berechnet werden, die sich gruppencharakteristisch deutlich voneinander unterschieden und eine Einsch\u00e4tzung des Erkrankungsrisikos erlaubten: (A) Thiamin 13,5 (4,61-28,8),TDP 51,0 (33,1-82,2),TMP 8,79 (2,23-18,1 ),Gesamtthiamin 73,3 (44,6-114); (B) Thiamin 8,73 (0,00-20,0),TDP 43,5 (15,5-75,7),TMP 6,15 (0,00-16,6), Gesamtthiamin 58,4 (18,7-96,5); (C) Thiamin 3,85 (0,00-11,5),TDP 14,5 (0,00-28,3),TMP 1,27 (0,00-4,87), Gesamtthiamin 19,6 (4,92-35,9). Somit steht mit der HPLC-Analyse mit Nachs\u00e4ulenderivatisierung ein pr\u00e4zises, weitgehend automatisierbares Me\u00dfverfahren zur raschen Diagnose eines Vitamin Bl-Mangels zur Verf\u00fcgung. Als kritischer unterer Normwert f\u00fcr gesunde Tiere l\u00e4sst sich f\u00fcr den Gesamtthiamingehalt im Blut 40 ng\/ml angeben. Das Probenmaterial (EDTA-Vollblut) kann bei bis zu 20 \u00b0C versandt werden. Im Gegensatz zu bisherigen Analyseverfahren erm\u00f6glichtes in CCN-gef\u00e4hrdeten Herden eine fr\u00fchzeitige und rasche Absch\u00e4tzung des Erkrankungsrisikos allerTiere.","date":{"year":2007,"date":"06\/2007","accepted":"2007-06-01"},"volume":"114","openAccess":false,"journal":"Berliner und M\u00fcnchener Tier\u00e4rztliche Wochenschrift","titleImageId":944,"pages":"212-218","redirects":["rinderblut-hplc-technik\/150\/3130\/71183"],"tierartCategories":[],"artikelartCategories":["Tier\u00e4rztliche Wochenschrift","Abostufe BMTW","Fachartikel"]} CY - Hannover DA - 06/2007 DO - 10.2377/0341-6593-114-212 LA - German N2 - In der vorliegenden Arbeit wurde geprüft, ob die direkte Messung von Thiamin und seinen Derivaten im Blut möglich und geeignet ist, um den aufwendigen Transketolasetest in der Diagnostik der Vitamin B,-Versorgung von Rindern zu ersetzen. Hierzu wurden Thiamin sowie Thiamindiphosphat (TDP) und Thiamin-monophosphat (TMP) durch Auftrennung mittels HPLC-Technik über Nachsäu-lenderivatisierung im Rinderblut bestimmt und klinischen Befunden in unverdächtigen Betrieben und solchen mit CCN-Patienten gegenüber gestellt. In Vorversuchen konnte geklärt werden, dass für diese Analysen EDTA-Vollblut am besten geeignet ist. Es darf bei 6 oder auch 20 °C bis zu 10Tage gelagert werden. Sensitivität und Spezifität waren als überdurchschnittlich gut einzuschätzen und sind denen anderer Verfahren (insbesondere dem Transketolasetest) deutlich überlegen. Die Variationskoeffizienten fürdie klinisch interessanten Parameter TDP und Gesamtthiamingehalt (Summe aller Fraktionen) lagen bei 1,95 % und 2,10 %, fürThiamin und TMP bei 7,02 % und 9,17 %. Die untere Nachweisgrenze betrug 0,5 ng/ml. Das Verfahren war gut für die Anforderungen aus der Praxis geeignet (täglich bis zu 72 Proben analysierbar). Aus Blutproben von 280 gesunden Rindern (A),201 CCN-Kohortentieren (B) und 12 CCN-Patienten (C) konnten folgende Mittelwerte für die Konzentrationen (ng/ml) von Thiamin und seinen Derivaten sowie deren 95 %-Bereich berechnet werden, die sich gruppencharakteristisch deutlich voneinander unterschieden und eine Einschätzung des Erkrankungsrisikos erlaubten: (A) Thiamin 13,5 (4,61-28,8),TDP 51,0 (33,1-82,2),TMP 8,79 (2,23-18,1 ),Gesamtthiamin 73,3 (44,6-114); (B) Thiamin 8,73 (0,00-20,0),TDP 43,5 (15,5-75,7),TMP 6,15 (0,00-16,6), Gesamtthiamin 58,4 (18,7-96,5); (C) Thiamin 3,85 (0,00-11,5),TDP 14,5 (0,00-28,3),TMP 1,27 (0,00-4,87), Gesamtthiamin 19,6 (4,92-35,9). Somit steht mit der HPLC-Analyse mit Nachsäulenderivatisierung ein präzises, weitgehend automatisierbares Meßverfahren zur raschen Diagnose eines Vitamin Bl-Mangels zur Verfügung. Als kritischer unterer Normwert für gesunde Tiere lässt sich für den Gesamtthiamingehalt im Blut 40 ng/ml angeben. Das Probenmaterial (EDTA-Vollblut) kann bei bis zu 20 °C versandt werden. Im Gegensatz zu bisherigen Analyseverfahren ermöglichtes in CCN-gefährdeten Herden eine frühzeitige und rasche Abschätzung des Erkrankungsrisikos allerTiere. PB - M. & H. Schaper GmbH PP - Hannover PY - 2007 SP - 212 EP - 218 T1 - Analyse von Vitamin B1 und dessen Derivaten im Rinderblut mittels HPLC-Technik bei gesunden, an CCN erkrankten Tieren und deren Kohorten T2 - Berliner und Münchener Tierärztliche Wochenschrift TI - Analyse von Vitamin B1 und dessen Derivaten im Rinderblut mittels HPLC-Technik bei gesunden, an CCN erkrankten Tieren und deren Kohorten TT - DOI 10.2377/0341-6593-114-212 VL - 114 SN - 0341-6593 ER -